微生物的分離、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。圖為大腸桿菌分離和
培養(yǎng)過(guò)程中部分操作示意圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
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(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手所采用的滅菌、消毒方法依次是 、 、 。
(2)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 。
(3)圖示是利用 法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步 分散到培養(yǎng)基的表面。在灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是 。
(4)關(guān)于圖示的操作方法和結(jié)果,敘述正確的是 。
A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌。
B.劃線操作須在火焰上進(jìn)行。
C.在5區(qū)域中才可以提到所需菌落。
D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌。
(5)若要培養(yǎng)具有耐高和耐酸特性的酵母菌,制備選擇培養(yǎng)基時(shí)在基本培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,注意 和 ,其目的是 。
(1)高壓蒸汽滅菌 干熱滅菌 化學(xué)消毒
(2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(2分)
(3)平板劃線 稀釋 以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種(2分)
(4)D(2分)
(5)添加高濃度蔗糖(葡萄糖) 調(diào)低pH 提供高糖和酸性的篩選環(huán)境(2分)
【解析】
試題分析:(1)無(wú)菌操作技術(shù)有消毒和滅菌,消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學(xué)藥劑消毒法,滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養(yǎng)基及容器的滅菌。(2)略;(3)接種有平板劃線法和稀釋平板法,本題是后者,反復(fù)把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)菌種的分離,在操作過(guò)程中灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是以免接種環(huán)溫度太高殺死菌種;(4)在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌主要是稀釋作用;(5)選擇培養(yǎng)基的考查,根據(jù)菌種的特殊性制定培養(yǎng)基,使其他菌群不能在此生長(zhǎng),達(dá)到選擇的目的。
考點(diǎn):本題考查微生物的分離和培養(yǎng),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
根據(jù)各類微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和新陳代謝類型,利用選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基,結(jié)合顯微鏡鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開(kāi)來(lái)。下面是分離篩選的方法步驟,請(qǐng)根據(jù)各個(gè)步驟的條件,填寫(xiě)空格中的內(nèi)容。?
首先配制一系列不同性質(zhì)的固體培養(yǎng)基,然后進(jìn)行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。?
(1)用無(wú)氮培養(yǎng)基可以篩選出 。?
(2)用不含有機(jī)碳源的選擇培養(yǎng)基可以篩選出 。?
(3)酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基中另加入 。?
(4)用加了較高濃度NaCl的培養(yǎng)基可以篩選出 ,?
根據(jù)菌落的顏色呈現(xiàn) 色,將其挑取單獨(dú)培養(yǎng)。?
(5)利用伊紅——美藍(lán)培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌,菌落呈 色并帶有金屬光澤的為 ,挑取該菌落單獨(dú)培養(yǎng)。結(jié)合顯微鏡鏡檢和進(jìn)一步用伊紅——美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別來(lái)確定。?
(6)在無(wú)氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌, 可以生長(zhǎng)。加入一定濃度的乳酸,使培養(yǎng)基pH充分降低,可抑制 菌的生長(zhǎng),利用菌落特征,結(jié)合顯微鏡鏡檢,選取具有生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的菌落,即可分離出 。
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科目:高中生物 來(lái)源:2012-2013學(xué)年吉林省汪清六中高二下學(xué)期第一次月考生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
根據(jù)各類微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和新陳代謝類型,利用選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基,結(jié)合顯微鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開(kāi)來(lái)。下面是分離篩選的方法步驟,請(qǐng)根據(jù)各個(gè)步驟的條件,填寫(xiě)空格中的內(nèi)容。
首先配制一系列不同性質(zhì)的固體培養(yǎng)基,然后進(jìn)行滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
⑴用無(wú)氮培養(yǎng)基可以篩選出 。
⑵用不含有機(jī)碳源的選擇培養(yǎng)基可以篩選出 。
⑶酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基另加入 。
⑷用加入了較高濃度的NaCl的選擇培養(yǎng)基可以篩選出 ,或者根據(jù)菌落的顏色呈現(xiàn) 色,將其挑取單獨(dú)培養(yǎng)。
⑸利用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌,菌落呈 色,并帶有金屬光澤的是 ,挑取單個(gè)菌落培養(yǎng)。結(jié)合顯微鏡檢和進(jìn)一步用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別來(lái)確定。
⑹在無(wú)氧條件下培養(yǎng)混合菌, 可以生長(zhǎng),加入一定濃度的乳酸,使培養(yǎng)基pH充分降低,可抑制 菌的生長(zhǎng),利用菌落特征,結(jié)合顯微鏡檢,選取生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的菌落,即可分離出 。
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科目:高中生物 來(lái)源:2012屆上海市上海理工大學(xué)附屬中學(xué)高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
生物乙醇是以生物為原料生產(chǎn)的可再生能源。我國(guó)利用農(nóng)作物廢棄物(秸稈)生產(chǎn)乙醇,其技術(shù)流程為:纖維素酶分解→酵母菌發(fā)酵→蒸餾→成品。如果向含有纖維素培養(yǎng)基中加入剛果紅染液時(shí),剛果紅會(huì)與纖維素形成紅色復(fù)合物,而呈現(xiàn)紅色,如果纖維素被降解,則培養(yǎng)基表面會(huì)形成以纖維素分解菌為中心的透明圈!≌(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
71、纖維素酶可以從能分解纖維素的細(xì)菌培養(yǎng)液中提取。某同學(xué)設(shè)計(jì)了從土壤中分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程:土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→鑒別培養(yǎng)。
①最好選擇 環(huán)境采集土樣。
②配置培養(yǎng)基時(shí),各種成分在熔化后分裝前必須進(jìn)行 ,接種前要進(jìn)行 。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中,一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行。在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí),平板冷凝后,應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置,這樣做的目的是 。
③以下是兩種培養(yǎng)基配方:
A培養(yǎng)基配方:
| KH2P04 | Na2HP04 | MgS04.7H20 | 纖維素酶 | 葡萄糖 | 尿素 | 瓊脂 |
| 1.4g | 2.1g | 0.2g | 1g | 10.0g | 1.0g | 15.og |
| KH2P04 | NaN03 | Na2HP04.7H20 | MgS04.7H20 | KCl | 纖維素粉 | 酵母膏 | 水解酪素 |
| 0.9g | lg | 1.2g | 0.5g | 0.5g | 5g | 0.5g | 0.5g |
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科目:高中生物 來(lái)源:2013屆安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(8分) 根據(jù)各類微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和新陳代謝類型,利用選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基,結(jié)合顯微鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的硝化細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開(kāi)來(lái)。 下面是分離篩選的方法步驟,請(qǐng)根據(jù)各個(gè)步驟的條件,填寫(xiě)空格中的內(nèi)容。 首先配制一系列不同性質(zhì)的固體培養(yǎng)基,然后進(jìn)行滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
(1) 用無(wú)氮培養(yǎng)基可篩選出 ;
(2) 用不含有機(jī)碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出 ;
(3) 用加了較高濃度NaCl的選擇培養(yǎng)基可篩選出 , 或者根據(jù)菌落的顏色呈現(xiàn) 色,將其挑取單獨(dú)培養(yǎng);
(4)在無(wú)氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌, 和 可以生長(zhǎng),加入一定濃度的乳酸,使培養(yǎng)基pH充分降低,可抑制 微生物的生長(zhǎng),利用菌落特征,結(jié)合顯微鏡檢,選取生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)菌落,即可分離出 。
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