Question

【題目】下面是獲得轉基因抗蟲棉的技術流程示意圖。

請回答：

(1)A→B利用的技術稱為______，其中②過程需要__________酶才能完成。

(2)圖中將目的基因導入棉花細胞需要經過③過程，該過程為構建基因表達載體，其目的是_____________________________________________________________________。

(3)上述流程示意圖中，將目的基因導入棉花細胞所采用的方法是__________法，該方法一般______(填“適宜”或“不適宜”)用于將目的基因導入單子葉植物。

(4)將目的基因導入植物細胞，除采用上圖中的方法外，還可采用____________法和花粉管通道法。

(5)從F→G的過程利用的主要技術為______________，欲確定抗蟲基因在G體內是否表達，在個體水平上需要做__________實驗。如果抗蟲基因導入成功，且與某條染色體的DNA整合起來，該轉基因抗蟲棉可視為雜合子，將該轉基因抗蟲棉自交一代，預計后代中抗蟲植株占______。

Answer 1

【答案】PCR 耐高溫的DNA聚合(Taq) 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在且可以遺傳給下一代，并能表達 農桿菌轉化 不適宜 基因槍 植物組織培養(yǎng) 抗蟲接種 3/4

【解析】

1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定。

2、PCR技術擴增目的基因：①原理：DNA雙鏈復制；②過程：第一步：加熱至90～95℃，DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。

3、分析題圖：圖示為利用生物技術獲得生物新品種的過程示意圖，其中①②表示采用PCR技術擴增目的基因；③表示基因表達載體的構建過程；C表示基因表達載體；然后將目的基因導入農桿菌中，再用選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質粒的土壤農桿菌，最后采用植物組織培養(yǎng)技術將轉基因植物細胞培育成轉基因植株。

（1）分析圖示可知，A→B利用的技術稱為PCR，由于PCR擴增過程中需要高溫處理，因此②過程需要熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）才能完成。

（2）圖中將目的基因導入棉花細胞需要經過C過程，該過程為構建基因表達載體（重組DNA），其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在且可以遺傳給下一代，并能表達。

（3）上述流程示意圖中，將目的基因導入棉花細胞所采用的方法是農桿菌轉化法，該方法一般不適宜用于將目的基因導入單子葉植物，對于單子葉植物采用基因槍法。

（4）將轉基因植物細胞培育成轉基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術，即從F→G的過程利用的主要技術為植物組織培養(yǎng)；欲確定抗蟲基因在G體內是否表達，在個體水平上，可用植株G的葉子喂食蟲子，即抗蟲性接種實驗，觀察其抗蟲的能力。如果抗蟲基因導入成功，且已經整合到宿主細胞一條染色體的DNA上，則該轉基因抗蟲棉可視為雜合子Gg，將該轉基因抗蟲棉自交一代，根據基因分離定律，預計后代中抗蟲植株G_占3/4。