將PVY病毒外殼蛋白基因(PVY-CP)導人馬鈴薯,并使之表達即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯。圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作,PVY-CP可以從質(zhì)粒A中獲取;質(zhì)粒B是選用的運載體,另已知部分限制酶識別序列和切割位點:
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請結(jié)合圖像,運用所學知識回答問題:
(1)含有PVY-CP的質(zhì)粒A保存在某細菌群體中,各個細菌含有相關不同的基因,這樣的細菌群體稱為????? 。
(2)關于步驟②中Klenow酶的猜測,合理的是?????????? 。
A.催化合成的片段起引物作用
B.可以將DNA片段的粘性末端變成平末端
C.能催化DNA鏈的合成
D.與DNA連接酶的功能相同
(3)步驟④中應該使用的限制酶是?????????? 。
(4)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進行轉(zhuǎn)化,首先需要將質(zhì)粒C導人?????????? 中,進而轉(zhuǎn)化馬鈴薯,然后通過?????????? 植物組織培養(yǎng),最后進行相關的鑒定。
(1)基因文庫 (部分基因組文庫、基因組文庫給分)。(2)BC(3)BglⅡ、SmaⅠ(僅答出一種酶給1分)(4)農(nóng)桿菌?? 植物組織培養(yǎng)
【解析】
試題分析:(1)將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷,導入受體菌群體儲存,各個受體菌分別含有這種生物的不同基因,為基因文庫。
(2)據(jù)圖分析,該過程表示PCR技術,該DNA片斷是要獲得PVY-CP,故A錯。Klenow酶將DNA的粘性末端變成平末端,需要合成新DNA片斷與之配對,故BC正確。沒有起到連接DNA片斷作用,故D錯。
(3)據(jù)表格分析,質(zhì)粒B用BglⅡ和SmaⅠ切割后,剛好一端為平末端,與步驟③DNA的平末端互補。另一端粘性末端,與步驟③DNA的粘性末端互補,再用DNA連接酶連接為重組質(zhì)粒。
(4)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進行轉(zhuǎn)化,首先需要將質(zhì)粒C導入農(nóng)桿菌,進而轉(zhuǎn)化馬鈴薯,然后通過植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
考點:本題考查基因工程相關知識,意在考查考生能理解所學知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)能力。
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