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【生物——現(xiàn)代生物科技專題】2008年1月7日，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)培育出我國第二代綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。研究人員是先從一種特殊水母中提取綠色熒光蛋白基因，然后把該基因經(jīng)過處理后轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)的豬胎兒成纖維細胞的基因組中，再把轉(zhuǎn)基因體細胞的細胞核移植到成熟的去核豬卵母細胞中構(gòu)建成轉(zhuǎn)基因胚胎。再經(jīng)過手術(shù)移植入受體母豬，經(jīng)過發(fā)育最終獲得綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。請據(jù)圖回答：

⑴過程①和②必需用到的酶是                      。

⑵重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有                才能構(gòu)成一個完整的基因表達載體。

⑶為了獲得更多的豬卵母細胞，可通過對母豬注射          的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細胞在體外培養(yǎng)到         期即可通過顯微操作將其細胞核去除。

⑷早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及          等物質(zhì)。

⑸如果想同時得到多頭綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬，可通過胚胎分割技術(shù)得以實現(xiàn)。但應(yīng)選擇              的早期胚胎進行操作，且要注意              ，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。

⑹與一般的繁育良種動物方式相比較，胎移植的優(yōu)勢是                       。

（8分）【生物—現(xiàn)代生物科技專題】
有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用，植物體細胞雜交要進行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進行動物細胞融合，可見細胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下列為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）若a、b分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于一對隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強度大于800lx時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細胞，較為簡便的篩選方法是                           。
（2）若a、b表示兩種植物體細胞，則采用化學(xué)法形成C時，一般是用         作為誘導(dǎo)劑。由d細胞形成雜種植株的原理是        ，這種育種方法的優(yōu)點是             。
（3）若a、b分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，則d細胞特點是             。
用        篩選獲得d細胞，然后再經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
（4）下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。順序是                            。

（8分）【生物—現(xiàn)代生物科技專題 】

 有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用，植物體細胞雜交要進行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進行動物細胞融合，可見細胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下列為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）若a、b分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于一對隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強度大于800lx時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細胞，較為簡便的篩選方法是                            。

（2）若a、b表示兩種植物體細胞，則采用化學(xué)法形成C時，一般是用          作為誘導(dǎo)劑。由d細胞形成雜種植株的原理是         ，這種育種方法的優(yōu)點是              。

（3）若a、b分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，則d細胞特點是              。

用         篩選獲得d細胞，然后再經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。

（4）下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。順序是                             。

【生物—現(xiàn)代生物科技專題 】

 有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用，植物體細胞雜交要進行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進行動物細胞融合，可見細胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下列為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）若a、b分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于一對隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強度大于800lx時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細胞，較為簡便的篩選方法是                            。

（2）若a、b表示兩種植物體細胞，則采用化學(xué)法形成C時，一般是用          作為誘導(dǎo)劑。由d細胞形成雜種植株的原理是         ，這種育種方法的優(yōu)點是              。

（3）若a、b分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，則d細胞特點是              。

用         篩選獲得d細胞，然后再經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。

（4）下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。順序是                             。

（8分）【生物―現(xiàn)代生物科技專題】人CD20單克隆抗體是治療一些惡性腫瘤的特效藥物，目前主要是通過培養(yǎng)哺乳動物細胞的方式生產(chǎn)。我國科學(xué)家已經(jīng)培育出世界上第一頭轉(zhuǎn)入了CD20抗體基因的轉(zhuǎn)基因牛，可以從它產(chǎn)的牛奶中直接提取CD20抗體。這項技術(shù)成熟后，有望使這一特效藥的生產(chǎn)成本降至現(xiàn)在的1/10。請回答：

（1）單克隆抗體的制備過程需先將__________和__________融合，這一過程的誘導(dǎo)方法與植物體細胞雜交不同的是_____________。

（2）動物細胞培養(yǎng)需要在含__________________混合氣體的培養(yǎng)箱中進行，培養(yǎng)液中通常需加入___________等一些天然成分。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心是___________。該過程用到的工具酶有____________和__________。