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下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因（通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法獲得）導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用運(yùn)載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答：

（1）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌B之前，一般要先用氯化鈣處理細(xì)胞，以_______________。（2）為了選出工程菌，應(yīng)配制含__________（物質(zhì)）的培養(yǎng)基，如果細(xì)菌能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)則表示導(dǎo)入成功，從用途來(lái)說(shuō)，該培養(yǎng)基屬于_______培養(yǎng)基。

（3）從人體內(nèi)直接提取的人生長(zhǎng)激素基因，與本題中的目的基因不同，原因是：______

（4）在細(xì)菌中檢測(cè)到___________________可證明已成功獲得工程菌。經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)后投入發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵，并注意控制發(fā)酵過(guò)程中PH、O₂和___________等條件。

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�人�?xì)菌細(xì)胞B制造工程菌的示意圖。已知細(xì)菌細(xì)胞B不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。質(zhì)粒A導(dǎo)人細(xì)菌細(xì)胞B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題

（1）目的基因可通過(guò)PCR技術(shù)獲取，這一技術(shù)中需要的酶是              。

（2）將目的基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要的工具酶有          。

（3）若要檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)人，可在培養(yǎng)細(xì)菌B的培養(yǎng)基中加入         （氨卞青霉素／四環(huán)素），若在培養(yǎng)基上觀(guān)察到大量細(xì)菌B的菌落，表明目的基因已成功導(dǎo)  人細(xì)菌B，此時(shí)所用的培養(yǎng)基屬于            培養(yǎng)基（按用途分）。

（4）若要比較準(zhǔn)確地了解轉(zhuǎn)化率，一般可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)活菌數(shù)目，還可以通過(guò)         的方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目；前者統(tǒng)計(jì)的活菌數(shù)目比實(shí)際的數(shù)目       （多／少／一樣），原因是         。為了保證統(tǒng)計(jì)數(shù)目的準(zhǔn)確，還應(yīng)該設(shè)計(jì)         。

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A.已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá).

（1）圖中質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合產(chǎn)生重組質(zhì)粒的過(guò)程通常是在體外完成的，此過(guò)程必須用到的工具酶為＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）在導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒，所以在基因工程的操作步驟中必須要有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿這一步驟.
（3）若將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌后，目的基因在“工程菌”中表達(dá)成功的標(biāo)志是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（16分）下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�人�?xì)菌細(xì)胞B制造工程菌的示意圖。已知細(xì)菌細(xì)胞B不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。質(zhì)粒A導(dǎo)人細(xì)菌細(xì)胞B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題

（1）目的基因可通過(guò)PCR技術(shù)獲取，這一技術(shù)中需要的酶是             。
（2）將目的基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要的工具酶有         。
（3）若要檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)人，可在培養(yǎng)細(xì)菌B的培養(yǎng)基中加入        （氨卞青霉素／四環(huán)素），若在培養(yǎng)基上觀(guān)察到大量細(xì)菌B的菌落，表明目的基因已成功導(dǎo) 人細(xì)菌B，此時(shí)所用的培養(yǎng)基屬于           培養(yǎng)基（按用途分）。
（4）若要比較準(zhǔn)確地了解轉(zhuǎn)化率，一般可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)活菌數(shù)目，還可以通過(guò)        的方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目；前者統(tǒng)計(jì)的活菌數(shù)目比實(shí)際的數(shù)目      （多／少／一樣），原因是        。為了保證統(tǒng)計(jì)數(shù)目的準(zhǔn)確，還應(yīng)該設(shè)計(jì)        。

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A.已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá).

（1）圖中質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合產(chǎn)生重組質(zhì)粒的過(guò)程通常是在體外完成的，此過(guò)程必須用到的工具酶為＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）在導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒，所以在基因工程的操作步驟中必須要有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿這一步驟.

（3）若將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌后，目的基因在“工程菌”中表達(dá)成功的標(biāo)志是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（16分）下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�人�?xì)菌細(xì)胞B制造工程菌的示意圖。已知細(xì)菌細(xì)胞B不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。質(zhì)粒A導(dǎo)人細(xì)菌細(xì)胞B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題

（1）目的基因可通過(guò)PCR技術(shù)獲取，這一技術(shù)中需要的酶是              。

（2）將目的基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要的工具酶有          。

（3）若要檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)人，可在培養(yǎng)細(xì)菌B的培養(yǎng)基中加入         （氨卞青霉素／四環(huán)素），若在培養(yǎng)基上觀(guān)察到大量細(xì)菌B的菌落，表明目的基因已成功導(dǎo)  人細(xì)菌B，此時(shí)所用的培養(yǎng)基屬于            培養(yǎng)基（按用途分）。

（4）若要比較準(zhǔn)確地了解轉(zhuǎn)化率，一般可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)活菌數(shù)目，還可以通過(guò)         的方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目；前者統(tǒng)計(jì)的活菌數(shù)目比實(shí)際的數(shù)目       （多／少／一樣），原因是         。為了保證統(tǒng)計(jì)數(shù)目的準(zhǔn)確，還應(yīng)該設(shè)計(jì)         。

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A.已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá).

（1）圖中質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合產(chǎn)生重組質(zhì)粒的過(guò)程通常是在體外完成的，此過(guò)程必須用到的工具酶為＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）在導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒，所以在基因工程的操作步驟中必須要有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿這一步驟.

（3）若將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌后，目的基因在“工程菌”中表達(dá)成功的標(biāo)志是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí)，效率還不高，根據(jù)導(dǎo)入情況及質(zhì)粒類(lèi)型，預(yù)測(cè)導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌類(lèi)型可能有哪些種類(lèi)？

（2）可通過(guò)如下步驟鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：將得到的細(xì)菌涂在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的就導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒(méi)有。使用這種方法鑒別的原因是什么？

（3）若把通過(guò)鑒定證明導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是________________________________________________，原因是____________________________________________________________________

（4）導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么？

（1）圖中A和B結(jié)合產(chǎn)生的C是________。完成此過(guò)程必須用到的工具酶是______

__。

（2）目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí)，效率還不高，導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，有的實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒，有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A，只有少數(shù)導(dǎo)入的是C。以下步驟可鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了A或C：

將得到的細(xì)菌培養(yǎng)在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了A或C，反之則沒(méi)有。使用這種方法鑒別的原因是：

　　___________________________________________________________________________

（3）若把通過(guò)鑒定證明導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是：______________。原因是______________________。

（4）導(dǎo)入細(xì)菌D細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么?

下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因B導(dǎo)入細(xì)菌D細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌D細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌D后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖中A和B結(jié)合產(chǎn)生的C是________。完成此過(guò)程必須用到的工具酶是______

__。

（2）目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí)，效率還不高，導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，有的實(shí)際上有的根本沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒，有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A，只有少數(shù)導(dǎo)入的是C。以下步驟可鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了A或C：

將得到的細(xì)菌培養(yǎng)在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了A或C，反之則沒(méi)有。使用這種方法鑒別的原因是：

　　___________________________________________________________________________

（3）若把通過(guò)鑒定證明導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是：______________。原因是______________________。

（4）導(dǎo)入細(xì)菌D細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么?