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38. (廣東A卷)(10分)生物技術(shù)實(shí)踐

(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生 　　　　　　　　，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測定植酸酶活性�；钚詼y定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間　　　 表示。

(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖

Ⅰ中的主要成分為　　　 ；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質(zhì)。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。

(3)為建設(shè)基因工程菌，可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：　　　 。反應(yīng)過程中打開模板DNA雙鏈的方法是　　　 。

23．(江蘇多選)下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有

　 A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞

　 B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)

C．蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化

31．(江蘇)(6分)酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對細(xì)胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛(以植物為食)消化腺中提��；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表。請回答有關(guān)問題。

(注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化)

(1)實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，其目的是▲ 　，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。

(2)從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有 　▲ 　等多種酶。該實(shí)驗(yàn)中▲ 　是空白對照組，其設(shè)置意義是▲ 　。

(3)用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用 　▲ 洗滌。

(4)原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是 　▲ 。

答案：(6分)(1)為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果

　 (2)果膠酶和纖維素酶I、Ⅱ、Ⅲ排除無關(guān)變量的干擾　 (3)等滲溶液

　 (4)低滲漲破法

　專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)

32、答案：(1)　

(2)②混勻，　37℃　恒溫水浴一段時(shí)間；③取出試管，分別加入適量的斐林試劑，混勻，沸水浴一段時(shí)間；④觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果�！�

(3)含有蔗糖和淀粉酶溶液的試管(試管甲)，以及含有淀粉和淀粉酶溶液的試管(試管乙)中出現(xiàn)磚紅色沉淀，其他試管中不出現(xiàn)磚紅色沉淀；(4)(哺乳動(dòng)物的蔗糖酶和淀粉酶)酶的催化作用具有專一性；(5)　20℃　低于酶的最適溫度，酶活性低，水解產(chǎn)生的還原糖少。

31(理綜1卷)(10分)

桃果實(shí)成熟后，如果軟化快，耐貯運(yùn)性就會(huì)差。下圖表示常溫下A、B兩個(gè)品種桃果成熟后硬度等變化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

據(jù)圖回答：

(1)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示桃果實(shí)成熟后硬度降低，其硬度降低與細(xì)胞壁中的　　　　　　　　

降解有關(guān)，該物質(zhì)的降解與　　　　　　　　　 的活性變化有關(guān)，也與細(xì)胞壁中的　　　　　

降解有關(guān)，該物質(zhì)的降解與　　 　　　　　　　　的活性變化有關(guān)。

(2)A、B品種中耐貯運(yùn)的品種是　　　　　　 。

(3)依據(jù)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，桃果實(shí)采摘后減緩變軟的保存辦法應(yīng)該是　　　　　　　　　　　 ，因?yàn)?u>　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)采摘后若要促使果實(shí)提前成熟，科選用的方法有　　　　　　　　　 和　　　　　　　 。

(5)一般來說，果實(shí)成熟過程中還伴隨著綠色變淺，其原因是 　　　　　　　　　　　　　　　。

答案：(10分)(1)纖維素，纖維素酶，果膠質(zhì)，果膠酶(2)A(3)適當(dāng)降低溫度，低溫可降低有關(guān)酶的活性，延緩果實(shí)軟化(4)用乙烯進(jìn)行處理，適當(dāng)提高貯存溫度(5)葉綠素含量降低

32.(17分)(全國理綜2)　

請用所給的實(shí)驗(yàn)材料和用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證哺乳動(dòng)物的蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有專一性。要求完成實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)步驟、預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果、得出結(jié)論，并回答問題�！�

實(shí)驗(yàn)材料與用具：適宜濃度的蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖、淀粉四種溶液，菲林試劑、試管、　37℃　恒溫水浴鍋，沸水浴鍋�！�

(1)若“+”代表加入適量的溶液，“-”代表不加溶液，甲、乙等代表試管標(biāo)號，請用這些符號完成下表實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，請?jiān)诖痤}卡上作答�！�

(2)實(shí)驗(yàn)步驟：　

①按照上表中的設(shè)計(jì)，取試管、加溶液�！�

②　

③　

④　

(3)結(jié)果預(yù)測：____________________________�！�

(4)結(jié)論：__________________________________�！�

(5)在上述試驗(yàn)中，如果僅將　37℃　恒溫水浴鍋的溫度調(diào)到　20℃　。而在其他條件不變的情況下重做上述實(shí)驗(yàn)，出現(xiàn)磚紅色試管中的顏色會(huì)比　37℃　時(shí)的淺，其原因是_______________。

22．(江蘇多選)加工橘子罐頭，采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，可以大量產(chǎn)生所用酶的有

　 A．生長在麥麩上的黑曲霉　　 B．生長在酸奶中的乳酸菌

C．生長在棉籽殼上的平菇　　 D．生長在木屑上的木霉

3．(江蘇)下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是

　 A．固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯

B．固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解氧

C．利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營養(yǎng)條件

　 D．利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物

34．(山東)(8分)(生物一生物技術(shù)實(shí)踐)

人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：

請回答：

(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行　　　　　　 　　　　　。

　　 接種前，要對人參根進(jìn)行　　　　　　　 。

(2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做　　　　　　　　 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于　　　　　　 　污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于　　　　　　

　　 污染。

(3)用少量　　　　　 酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。

(4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用　　　　　

　　 方法，操作時(shí)應(yīng)采用　　　　　　　　 加熱。

答案：(1)滅菌　　 消毒

　 (2)外植體　 真菌(霉菌)　　 細(xì)菌

　 (3)果膠

(4)萃取(浸取)　　 水浴

專題四酶的研究與應(yīng)用

6. (安徽)下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是

A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

B.取10⁴、10⁵ 、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上

C．將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37⁰C恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)

D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

3(重慶)下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是

　 A大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖，其擬核是一個(gè)環(huán)狀DNA分子

　 B在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源

　 C用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時(shí)．應(yīng)及時(shí)添加核酸等生長因子

　 D處于對數(shù)期的大腸桿菌．常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料

專題三植物組織培養(yǎng)技術(shù)

33.(10分)(全國理綜2)　

利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿，具有廣闊的應(yīng)用前景。但現(xiàn)有野生菌株對淀粉的轉(zhuǎn)化效率低，某同學(xué)嘗試對其進(jìn)行改造，以獲得高效菌株�！�

(1)實(shí)驗(yàn)步驟：　

①配置________(固體、半固體、液體)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為________。　

②將_____________接入已滅菌的培養(yǎng)基平板上�！�

③立即用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是___________________。　

④菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn)_______________現(xiàn)象的菌落即為初選菌落，經(jīng)分離、純化后即可達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康�。�?/p>

(2)若已得到二株變異菌株I和II，其淀粉轉(zhuǎn)化率較高，經(jīng)測定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，突變發(fā)生在淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū)，可推測出菌株I的突變發(fā)生在_________區(qū)，菌株II的突變發(fā)生在____________區(qū)。

答案：(1)①固體、玉米淀粉；②野生菌株；③(誘發(fā)野生菌株發(fā)生基因突變)對野生菌株進(jìn)行誘變；④(透明圈)淺色范圍大；(2)編碼區(qū)、非編碼區(qū)